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1. 基因工程中,可利用报告基因(如增强绿色荧光蛋白基因,EGFP基因)与目的基因相连形成融合基因,用于鉴定目的基因是否在受体细胞中表达。为培育抗冻的转基因番茄品种,研究人员设计了四种引物将多毛番茄的CBF1基因与EGFP基因通过融合PCR技术进行融合,如下图所示。回答下列问题:
(1)
PCR反应中引物的作用是使
从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。为使CBF1基因与EGFP基因成功连接,应使引物R1和F2
。
(2)
利用重叠PCR构建融合基因时,第一轮PCR产生的DNA链①~⑧中,
(填“能”或“不能”)选取①和⑧进行组合。继续进行PCR扩增后,产生的子链⑨~⑫中,子链相互连接后不利用引物即可进行扩增的组合是
,理由是
。
(3)
引物F1和R2含有限制酶NcoI、BstEⅡ识别的序列,在引物中添加这两种限制酶识别序列的目的是
。
【考点】
DNA分子的结构; PCR技术的基本操作和应用; 基因工程的操作程序(详细);
【答案】
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综合题
普通
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1. 下图是某DNA分子的局部结构示意图,请据图回答:
(1)
写出下列图中序号代表的结构的中文名称:①
,⑦
,⑧
,⑨
。
(2)
图中DNA片段中碱基对有
对,该DNA分子应有
个游离的磷酸基。
(3)
如果将
14
N标记的细胞培养在含
15
N标记的脱氧核苷酸的培养液中,此图所示的
(填图中序号)中可测到
15
N。若细胞在该培养液中分裂四次,该DNA分子也复制四次,则得到的子代DNA分子中含
14
N的DNA分子和含
15
N的DNA分子的比例为
。
(4)
若该DNA分子共有
a
个碱基,其中腺嘌呤有
m
个,则该DNA分子复制4次,需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸为
个。
综合题
普通