1. 基因工程中,可利用报告基因(如增强绿色荧光蛋白基因,EGFP基因)与目的基因相连形成融合基因,用于鉴定目的基因是否在受体细胞中表达。为培育抗冻的转基因番茄品种,研究人员设计了四种引物将多毛番茄的CBF1基因与EGFP基因通过融合PCR技术进行融合,如下图所示。回答下列问题:

   

(1) PCR反应中引物的作用是使从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。为使CBF1基因与EGFP基因成功连接,应使引物R1和F2
(2) 利用重叠PCR构建融合基因时,第一轮PCR产生的DNA链①~⑧中,(填“能”或“不能”)选取①和⑧进行组合。继续进行PCR扩增后,产生的子链⑨~⑫中,子链相互连接后不利用引物即可进行扩增的组合是,理由是
(3) 引物F1和R2含有限制酶NcoI、BstEⅡ识别的序列,在引物中添加这两种限制酶识别序列的目的是
【考点】
DNA分子的结构; PCR技术的基本操作和应用; 基因工程的操作程序(详细);
【答案】

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