木材和树皮具有坚硬、不容易腐烂的特性，这与木材中的木质素有关。木质素是一类复杂的有机聚合物，是植物界中储量仅次于纤维素的第二大生物质资源。为了更好地利用木质素，科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物。回答下列问题：

1. 木材和树皮具有坚硬、不容易腐烂的特性，这与木材中的木质素有关。木质素是一类复杂的有机聚合物，是植物界中储量仅次于纤维素的第二大生物质资源。为了更好地利用木质素，科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物。回答下列问题：

(1) 为分离木质素分解菌，科研人员利用木材场土壤制得土壤浸出液，理由是，为保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来的，图中进行的操作是，图中土壤共稀释了倍。

(2) 图中所用培养基常用的灭菌方法为，为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是。

(3) 采用苯胺蓝培养基筛选木质素分解菌时，在适宜条件的恒温箱中培养得到了上图⑥中的菌落，推测⑥中含有不以木质素作为碳源的菌落，推测依据是。⑥中菌落（填数字）合成的木质素降解酶最多。

【考点】

微生物的分离和培养; 纤维素分解菌的分离; 灭菌技术;

【答案】

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综合题普通

1. 纤维素是厨余垃圾中占比较多的一种成分，纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素。某生物兴趣小组欲从牛的瘤胃内容物中分离并筛选出能高效降解纤维素的纤维素分解菌，如图1所示。请回答下列问题：

(1) 常规微生物实验中，下列物品及其消毒或灭菌方法错误的是（填编号）。

编号	①	②	③	④
物品	培养基	超净工作台	涂布器	培养皿
消毒或灭菌方法	干热灭菌	紫外线照射	灼烧灭菌	干热灭菌

(2) 初选候选菌时使用的培养基中除含有水、无机盐、氮源等营养物质，还要以为唯一碳源。

(3) 为了获得能高效分解纤维素的细菌，过程③应选择残余纤维素浓度（填“最高”或“最低”）的培养瓶中的微生物进一步接种。

(4) 小组的甲、乙两位同学利用稀释涂布平板法测定提取的瘤胃样品中纤维素分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学在该浓度下涂布了1个平板，统计的菌落数为56；乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为43、54、266，然后取其平均值121作为统计结果。请判断这两位同学的实验结果是否有效，并说出理由：①甲同学：。②乙同学：。

(5) 该小组又利用筛选到的纤维素分解菌获取纤维素酶进行了相关研究，结果如图2。（注：A酶和B酶分别是两种微生物分泌的纤维素酶。）该小组判断酶更适合用来处理厨余垃圾，依据是。

综合题普通

2. 农作物秸秆中含有大量的纤维素，利用微生物转化的方法可以将纤维素转化成葡萄糖，而葡萄糖是重要的食品和工业原料。请回答下列问题：

(1) 焚烧秸秆对生态环境会产生负面影响，其主要原因是（答出一点）。

(2) 利用纤维素分解菌所分泌的可以将秸秆中的纤维素转化为葡萄糖。生物燃料——乙醇可以替代部分化石燃料，为避免大量生产燃料乙醇而导致粮食短缺的风险，可以采取的措施是（答出一点）。

(3) 纤维素分解菌可以从富含纤维素的土壤中分离获得，从土壤中分离纯化纤维素分解菌常用的接种方法中，法可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际结果。鉴别纤维素分解菌需在培养基中加入染液，如果有纤维素分解菌存在，则培养基中以该菌落为中心的周围会出现。

综合题普通

3. 纤维素酶在现代工业中具有广泛应用。某研究小组从土壤微生物中分离可以产生纤维素酶的纤维素分解菌，进行微生物培养。回答下列问题：

(1) 采集土壤样品时，可以选择树林中多年落叶形成的腐殖土，原因是该菌大多分布在富含的环境中。

(2) 将土壤样品溶解在无菌水中，通常用法进行接种，选择出菌落数为30~300的平板进行计数，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，能够通过菌落数计算活菌数的原因是。

(3) 在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红与纤维素形成红色复合物，所以纤维素分解菌菌落会呈现的现象是。如图为几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的菌落，通常选择图中（填字母）所示位置的菌落进行进一步培养和筛选。

(4) 用纤维素分解菌分解秸秆生产酒精，这样做的现实意义有。

综合题普通