三白草和鱼腥草是同科不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）用到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产的具体操作如图1，进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。

1. 三白草和鱼腥草是同科不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）用到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产的具体操作如图1，进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。

(1) 图1中①过程通过酶解法去除获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带的杂种原生质体。

(2) 由图2可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为个/mL。

(3) 通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。

组别	A组	B组	C组（空白对照组）
实验处理	三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物	三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物
实验处理	每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量

①表格中C组的实验处理为。

②若实验结果为，则支持利用原生质体融合技术将复方配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。

【考点】

植物体细胞杂交的过程及应用; 细胞融合的方法;

【答案】

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实验探究题普通

1. 甘蔗是蔗糖的主要来源，甘蔗R具有高产高糖的优良特性但耐寒性差；甘蔗G 是耐寒品种。科研人员利用植物体细胞杂交技术以期快速培育出耐寒性更强且性状更优良的甘蔗新品种。

(1) 如图1，利用去除细胞壁获得原生质体。分别加入 IOA 和 R-6G钝化后诱导原生质体融合。仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是。

(2) 科研人员发现制备原生质体及原生质体融合后均会不同程度发生氧化褐变、细胞壁再生困难的现象。为解决这一问题，科研人员利用甘蔗杂种原生质体进行以下实验。

①由图2可知，甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用。

②科研人员推测激素通过促进果胶合成关键酶基因GAUT 表达，从而促进细胞壁再生，请将下表补充完整为该推测提供证据（选填下列字母）。

组别	激素使用	实验处理	检测指标
1		原生质体中转入过量表达GAUT基因载体
2	a	原生质体中转入抑制GAUT基因表达载体
3		不转入基因的原生质体

a.不使用激素

b.使用激素组合1

c.使用激素组合 2

d.原生质体中2，4-D和6-BA的含量

e.完成再生壁的细胞比例

③上表实验是否能够达成完整验证推测的目的?请简述理由。

实验探究题困难

2. 图1是单克隆抗体制备流程阶段示意图，图2是植物体细胞杂交过程示意图。据图回答下列问题：

（1）图1过程中，假设仅考虑某两个细胞的融合可形成种类型的杂交细胞，促进动物细胞融合的常用方法有（写出2种）。经HAT培养基选出的杂交瘤细胞的特点是。

（2）选育出的杂交瘤细胞采用两种方法培养，获取大量单克隆抗体。

（3）图2过程中步骤①是，最常用的方法是。植物体细胞融合成功的标志是。

（4）如果A，B植物均为二倍体，则该杂种植物体细胞中有个染色体组。科学家利用该技术培育出了白菜-甘蓝等杂种植株，这一技术的优点是。

实验探究题普通

3. 利用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄，地下结马铃薯的“超级作物”。

(1) 材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用了原生质体融合和技术，该技术的理论基础是。

(2) 图中①步骤所示用除去植物细胞的细胞壁，分离出有活力的原生质体。

(3) 图中②过程细胞两两融合时，可出现种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有和两类激素。

(4) 由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④和⑤过程。

实验探究题普通