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高中生物学
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综合题
1.
(2023高三上·重庆模拟)
DNA分子杂交时,常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法,其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。在PCR反应的早期10-15个循环中,扩增产物主要是双链DNA,当后期数量较少的限制性引物耗尽后,数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。
(1) 若A链为所需的DNA分子探针,则非限制性引物应选用引物
;PCR反应缓冲体系中一般要添加
以激活耐高温的DNA聚合酶。
(2) 进行最初10-15个循环的目的是
。如果体系中原模板DNA的数量为a,最初10次循环产物为双链,后15次循环产物为单链,则最终获得的单链探针数为
。因为DNA单链与双链的分子量不同,可通过
将单链探针DNA分离出米。
(3) 为精确控制产物生成量,科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物,在进行一定的循环次数后,适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是
。
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PCR技术的基本操作和应用
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更新时间:2024-02-03
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