实验材料:PBMC细胞悬液(人外周血单个核细胞,主要是淋巴细胞和单核细胞)、细胞培养液、一系列不同浓度的环孢素、胰岛素、S961、锥形瓶等。
(要求与说明:免疫抑制剂的作用程度可用半致死量IC50表示、即在规定时间内一半免疫细胞死亡时使用的免疫抑制剂浓度,环孢素是一种免疫抑制剂,S961是一种胰岛素受体拮抗剂;实验中涉及的剂量不作具体要求:实验条件适宜)
①取锥形瓶若干,随即均分成4组,编号为A、B、C、D,分别加入等量适量PBMC细胞悬液和细胞培养液,用MTT法检测各组活细胞数量并记录。
A组:加入适量细胞培养液;
B组:加入等量适宜浓度的胰岛素溶液;
C组:加入,作为对照;
D组:加入。
②按上述分组加入相应试剂后。将培养瓶放入CO2恒温培养箱中培养96h,用MTT法检测各组活细胞数量并记录,计算C、D组的,并得出C、D组环孢素的IC50.
②若实验中A、B组的细胞存活情况相同,说明。
③进一步研究发现PBMC细胞中的表达量增加,说明胰岛素可能是直接作用于免疫细胞,提高了其活性。为了证明此作用,可增加一组实验组,该组的处理是。