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1. 农田生态系统属于人工生态系统，收获农产品导致农田生态系统不断向系统外输出物质，从而引起土壤贫瘠，不利于作物生长。研究小组计划通过施放由纤维素分解菌及自生固氮菌（能够独立进行固氮的细菌）组成的复合菌剂，促进回田的农作物秸秆等有肥料的分解，以改善土质和增加土壤氮元素。下表为该小组配置的两种培养基的配方，请回答下列问题：

培养基种类

培养基的配方

Ⅰ号培养基

CMC-Na、酵母膏、KH2PO4、琼脂、蒸馏水

Ⅱ号培养基

KH2PO4、NaCl、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水
(1) 根据配方分析，筛选自生固氮菌应该选择号培养基，理由是。
(2) 筛选和鉴定纤维素分解菌，需选择号培养基并添加。如果实验过程中没有污染和其他失误，经过多次选择培养，平板中都出现多种差异明显的菌落，这样的结果说明。选择某种纤维素分解菌（记为D）测定其降解农作物秸杆的能力，农作物秸秆主要为D提供。
(3) 不同类型微生物混合培养常会出现因相互抑制而在菌落周围出现透明圈的现象，为确定两种微生物是否适合联合施用，在完全培养基上均匀涂布纤维素分解菌，再在其表面接种自生固氮菌，适宜条件下培养一段时间后，观察。
(4) 经检测，实验室条件下降解效率很高的纤维素分解菌在实际环境中降解率却很低，可能的原因是。
【考点】
纤维素分解菌的分离;
【答案】

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实验探究题 普通
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1. 研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和酶。

（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是，操作时采用的灭菌方法是。

（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成色复合物，但并不与水解后的和发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在时就加入刚果红。（第一种、第二种）方法会使菌落之间发生混杂。

（4）如果观察到产生的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的进行定量的测定。
实验探究题 普通
2. 从土壤中分离纤维素分解菌，使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料。请回答下列有关问题。
(1) 纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少它包括C1酶、CX酶和。
(2) 图中，对土壤浸出液进行选择富集培养后，进一步通过步骤⑤分离纯化。其中，①和⑤所用培养基成分的主要差异是。
(3) 图中，A和B接种方法的共同目的是。请简要叙述A的接种操作过程。
(4) 若要鉴别纤维素分解菌的菌落，可在培养基中加入染料。
实验探究题 普通
3. 焚烧秸秆会严重污染空气，危害人体健康。土壤中的纤维素分解菌能将纤维素分解为小分子糖类，分解后的糖类可进一步转化成乙醇等清洁能源，实现废物再利用。研究人员利用图甲所示程序尝试从土壤中分离分解纤维素的分解菌。回答下列问题：

(1) 微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是。
(2) 图甲所示的接种方法为，富集培养的目的是，培养基中（填图中序号）区域更易获得单菌落。
(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用图乙的方法接种。在选育过程中，应将目的菌接种于以为唯一碳源的固体培养基上。
(4) 采用刚果红染色法直接筛选出高效的目的菌，可比较单菌落周围的大小。实验结果如图乙显示的A〜E五种菌株中，是最理想菌株。利用图乙的方法对目的菌数目统计时，统计的菌落数目往往比活菌的实际数目偏小，原因是。
实验探究题 普通