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1. 为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色

(1) 将草甘膦抗性基因作为，与Ti质粒用酶处理构建基因表达载体。
(2) 用处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
(3) 取某品种水稻的幼胚，进行消毒处理，接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。
(4) 除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否。
(5) 为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻，还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案，筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。
【考点】
基因工程的应用;
【答案】

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1. 当今社会发展倡导以绿色为核心的生态发展观，绿色农产品的生产是人们健康生活的源头。为降解农产品的农药（马拉硫磷）残留，科学家用基因工程技术生产了CarE（羧酸酯酶）制剂，生产过程如图所示。

(1) 提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①过程获得总cDNA，利用PCR技术可以选择性扩增CarE基因的cDNA，原因是 。
(2) 与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是。
(3) 在③过程中，要用CaCl2处理大肠杆菌，使其变成细胞；
(4) 若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质技术，通过，间接实现对CarE的改造，以满足生产和生活的需求。
(5) 假如请你为CarE（羧酸酯酶）制剂设计产品说明书，你认为在保存以及使用上应注意哪些事项？（写出1点，合理即可）。
综合题 普通
2. 新型冠状病毒（2019-nCoV，一种RNA 病毒）的S蛋白和N蛋白都是诱发机体免疫反应的主要抗原。病毒载体疫苗是研制新冠病毒疫苗的技术路线之一，下图是生产重组腺病毒疫苗的流程。回答下列问题∶

(1) 制备新冠病毒疫苗时，需将获得的目的基因转入转移载体 pShuttle质粒，图中的目的基因应选用。不能直接从 2019-nCoV 的基因组中获取目的基因，理由是。
(2) pAdEasy质粒可表达出腺病毒，除了启动子、终止子、复制原点外，其相关基因序列还包含（ 答两种），过程①需要的酶是。
(3) 若 PacⅠ酶在过程②中使用，该酶所作用的化学键是。线性 pAd需要转入特定细胞才能产生重组腺病毒，理由是。据图分析，与重组 pAd 相比，线性 pAd 对人体相对安全，理由是。
(4) 通常将重组腺病毒进行，可使人获得新冠病毒的免疫力。
综合题 普通
3. 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它是一种抗病毒的特效药。中国“干扰素之父”侯云德院士利用基因工程的方法获得了人干扰素a-lb，用于临床疾病的治疗。回答下列相关问题。
(1) 获得基因工程用的干扰素基因，需从细胞的细胞质中获得mRNA，经逆转录获得cDNA，该基因中不包括正常干扰素基因的片段，再利用PCR技术扩增干扰素基因，扩增干扰素基因的前提是，以便合成引物。
(2) 大肠杆菌和酵母菌均可作为基因工程的受体菌，生产干扰素a-lb时宜选用后者，原因是。
(3) 有人尝试让植物细胞产生干扰素，探索发现水稻胚？L细胞作为反应器的效果比较好。若用农杆菌转化法进行目的基因的导入，添加一定量的酚类物质效果更好，原因是。在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将干扰素基因插入T-DNA片段（填“内”或“外”），Ti质粒上的T-DNA的作用是。鉴定水稻胚乳细胞中干扰素基因是否表达可采用的方法是。
综合题 普通