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1. 科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑系统，成功改造了猕猴基因组中与某病症（Z症）相关的 SHANK3基因，制备出Z症非人灵长类动物模型，为该病的研究和治疗奠定了重要基础。操作过程如图。

回答下列问题。

(1) 进行甲过程前，采集的卵母细胞需在体外培养到期才能与获能的精子受精。
(2) 将CRISPR/Cas9基因编辑系统注入受精卵后，Cas9蛋白能在特定部位切割SHANK3基因（下图虚线所示），使该基因特定部位的两个核苷酸之间的断开，经其切割后产生具有末端的DNA片段。……

(3) 乙过程应将受精卵移入中继续培养，该过程通常需要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。丙表示的过程是。
(4) 由以上技术获得的Z症猕猴，可通过体细胞核移植技术得到克隆Z症猕猴，请写出基本程序（用流程图表示）
【考点】
基因工程的应用; 动物细胞核移植技术; 胚胎移植; 体外受精; 胚胎的体外培养;
【答案】

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综合题 普通
能力提升
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1. 当今社会发展倡导以绿色为核心的生态发展观，绿色农产品的生产是人们健康生活的源头。为降解农产品的农药（马拉硫磷）残留，科学家用基因工程技术生产了CarE（羧酸酯酶）制剂，生产过程如图所示。

(1) 提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①过程获得总cDNA，利用PCR技术可以选择性扩增CarE基因的cDNA，原因是 。
(2) 与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是。
(3) 在③过程中，要用CaCl2处理大肠杆菌，使其变成细胞；
(4) 若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质技术，通过，间接实现对CarE的改造，以满足生产和生活的需求。
(5) 假如请你为CarE（羧酸酯酶）制剂设计产品说明书，你认为在保存以及使用上应注意哪些事项？（写出1点，合理即可）。
综合题 普通
2. 新型冠状病毒（2019-nCoV，一种RNA 病毒）的S蛋白和N蛋白都是诱发机体免疫反应的主要抗原。病毒载体疫苗是研制新冠病毒疫苗的技术路线之一，下图是生产重组腺病毒疫苗的流程。回答下列问题∶

(1) 制备新冠病毒疫苗时，需将获得的目的基因转入转移载体 pShuttle质粒，图中的目的基因应选用。不能直接从 2019-nCoV 的基因组中获取目的基因，理由是。
(2) pAdEasy质粒可表达出腺病毒，除了启动子、终止子、复制原点外，其相关基因序列还包含（ 答两种），过程①需要的酶是。
(3) 若 PacⅠ酶在过程②中使用，该酶所作用的化学键是。线性 pAd需要转入特定细胞才能产生重组腺病毒，理由是。据图分析，与重组 pAd 相比，线性 pAd 对人体相对安全，理由是。
(4) 通常将重组腺病毒进行，可使人获得新冠病毒的免疫力。
综合题 普通
3. 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它是一种抗病毒的特效药。中国“干扰素之父”侯云德院士利用基因工程的方法获得了人干扰素a-lb，用于临床疾病的治疗。回答下列相关问题。
(1) 获得基因工程用的干扰素基因，需从细胞的细胞质中获得mRNA，经逆转录获得cDNA，该基因中不包括正常干扰素基因的片段，再利用PCR技术扩增干扰素基因，扩增干扰素基因的前提是，以便合成引物。
(2) 大肠杆菌和酵母菌均可作为基因工程的受体菌，生产干扰素a-lb时宜选用后者，原因是。
(3) 有人尝试让植物细胞产生干扰素，探索发现水稻胚？L细胞作为反应器的效果比较好。若用农杆菌转化法进行目的基因的导入，添加一定量的酚类物质效果更好，原因是。在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将干扰素基因插入T-DNA片段（填“内”或“外”），Ti质粒上的T-DNA的作用是。鉴定水稻胚乳细胞中干扰素基因是否表达可采用的方法是。
综合题 普通