秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，以纤维素为唯一碳源并加入刚果红的培养基经接种后，若微生物菌种能分解纤维素，则会出现以菌落为中心的透明圈。科研人员从土壤中分离了五种能分解纤维素的细菌菌株，培养基中出现了因分解纤维素而产生的透明圈，操作过程如下图所示。下列叙述错误的是（）

1. 下列有关消毒与灭菌的说法，正确的是（）

① 日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法

② 对接种室、接种箱或超净工作台要使用巴氏消毒法进行消毒

③ 实验操作者的双手使用酒精进行灭菌

④ 接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌

⑤ 培养基常使用高压蒸汽法进行灭菌

A. ①②③ B. ③④⑤ C. ①②③④⑤ D. ①④⑤

单选题容易

2. 在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析错误的是（）

A. 透明圈内的刚果红染料已被分解 B. 菌落①中的菌株降解纤维素能力最强 C. 图中菌落可能是细菌也可能是真菌 D. 图中培养基以纤维素为唯一碳源

单选题容易

3. 下列有关消毒与灭菌的说法，正确的是（）

①日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法②对接种室、接种箱或超净工作台要使用巴氏消毒法消毒③实验操作者的双手使用酒精进行灭菌④接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌⑤培养基常使用湿热灭菌法进行灭菌

A. ①②③ B. ③④⑤ C. ①②③④⑤ D. ①④⑤

单选题容易

1. 关于消毒和灭菌的不正确理解是（）

A. 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、包括芽孢和孢子 B. 消毒和灭菌实质上是相同的 C. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 D. 常用消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法

单选题普通

2. 如图，在含有纤维素的培养基中加入刚果红后，刚果红可以与纤维素形成红色复合物。但当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。下列叙述错误的是（　　）

A. 该实验所用的培养基中需加入凝固剂 B. 该实验所用的接种方法为稀释涂布平板法 C. 若要获得纤维素分解菌，应选甲菌落进一步纯化 D. 实验中使用过的培养基在丢弃前需要经过灭菌处理

单选题普通

3. 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（）

①化学消毒②湿热灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤灼烧灭菌⑥巴氏消毒法

A. ⑤③⑤①④⑥ B. ③②⑤④①⑥ C. ②③⑤①④⑥ D. ②②⑤④①⑥

单选题普通

1. 研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C₁酶、C_X酶和酶。

（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是，操作时采用的灭菌方法是。

（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成色复合物，但并不与水解后的和发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在时就加入刚果红。（第一种、第二种）方法会使菌落之间发生混杂。

（4）如果观察到产生的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的进行定量的测定。

实验探究题普通

2. 纯净的微生物培养物在现代生物技术、医学研究与实践中有着广泛应用，无菌技术是获取纯净的微生物培养物的关键。下列有关无菌技术的说法，正确的是（）

多选题普通

3. 研究表明，芒果废弃物中较难分解的成分为纤维素。合理选择并使用纤维素降解微生物对减轻芒果废弃物污染和资源浪费是一项重大突破。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。为选择并培养能够分解芒果中纤维素的细菌，某科研小组进行了如下操作。请分析回答相关问题：

（1）对配制的培养基用灭菌效果最好，目的是。

（2）取10g样品，放入盛有30mL选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，振荡培养1〜2d，增加溶氧量，目的是；然后采用法将微生物接种到培养基上。

（3）待菌群生长后，挑取不同形态特征的菌落分离，接种至以为唯一碳源的培养基上，加入能与培养基中的碳源形成红色复合物的刚果红；一段时间后应挑选的菌落来选纤维素分解菌。

综合题容易

1. 某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶，以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料，设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题：

①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别（加入刚果红）纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落

(1) 纤维素分解菌选择培养的培养基该如何设计。

(2) 在培养基中还要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是。

(3) 图甲所示接种方法常用的接种工具是接种环，对其通常用法灭菌。

(4) 若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在鉴别平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落不超过200个，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释倍。在鉴别培养基中含有KH₂PO₄和Na₂HPO₄ ，其作用是：（写两点）。

(5) 图乙中出现的无透明带的菌落，其代谢类型（同化作用类型）最可能是。

(6) 流程图中步骤⑤的操作中，应挑选产生了的菌落。

综合题普通

2. 人工瘤胃模仿了牛、羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

(1) 获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术主要包括和。

(2) 在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是（填序号）。

①显微镜②培养皿③酒精灯④无菌水⑤接种针

(3) 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落（见图1）。图1中降解圈大小与纤维素酶的有关。图1中降解纤维素能力最强的菌株是①，依据是。

(4) 研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果如图2，推测菌株更适合用于人工瘤胃发酵，理由是。

综合题普通

3. 滚管培养法是分离厌氧微生物的常用方法，其过程为：先将样品稀释液注入盛有50℃左右培养基的密封试管中，然后将试管平放于盛有冰块的盘中迅速滚动，带菌的培养基会在试管内壁凝固成薄层，培养一段时间后即可获得单菌落。研究小组按照如图所示流程分离反刍动物瘤胃中的纤维素分解菌。回答下列问题：

(1) Ⅰ过程所用培养基中（填“需要”或“不需要”）添加凝固剂。为了筛选可分解纤维素的微生物，在配制Ⅱ过程所用培养基时，应注意（从培养基成分角度分析）。Ⅲ过程可根据菌落特征来初步区分不同种类的纤维素分解菌，原因是。

(2) 实验中所用到的培养皿、试管和培养基等均需要进行灭菌处理。其中必须用湿热灭菌法进行灭菌的是，其不能使用干热灭菌法灭菌的原因有（答两点）。

(3) 为分析该动物瘤胃中纤维素分解菌的数量，研究小组在4个平板上，利用法各接种稀释倍数为10³的上述纯培养菌液样品0.1mL，在（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56，则每升原菌液样品中纤维素分解菌的数量为。

实验探究题普通